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ELISA试剂盒如何精准检测自身免疫病?
发表时间:2025-07-18
ELISA试剂盒:精准捕捉自身免疫疾病的“幕后黑手”
自身免疫疾病,如同一场人体内部的“误伤悲剧”——免疫系统这个本该抵御外敌的“忠诚卫士”,错误地将自身健康的组织、器官或细胞识别为“入侵者”,并发动猛烈攻击。这种持续的自我攻击会导致广泛的炎症和组织损伤,引发一系列复杂的慢性疾病,如类风湿关节炎的关节疼痛变形、系统性红斑狼疮的多系统损害、1型糖尿病的胰岛素生产细胞破坏等。
常见的自身免疫疾病示例:
1. 类风湿关节炎 (Rheumatoid Arthritis, RA):免疫系统主要攻击关节滑膜,导致关节疼痛、肿胀、僵硬和进行性损伤。核心检测靶点:类风湿因子 (RF)和 抗瓜氨酸化蛋白抗体 (ACPA/抗CCP抗体)。
2. 系统性红斑狼疮 (Systemic Lupus Erythematosus, SLE):可影响皮肤、关节、肾脏、血液系统、神经系统等多个器官。核心检测靶点:抗核抗体 (ANA)及其特异性抗体谱(如抗dsDNA抗体、抗Sm抗体)。
3. 1型糖尿病 (Type 1 Diabetes Mellitus, T1DM):免疫系统特异性破坏胰腺中产生胰岛素的β细胞。核心检测靶点:抗胰岛细胞抗体 (ICA)、抗谷氨酸脱羧酶抗体 (GADA)、抗胰岛素抗体 (IAA)、抗酪氨酸磷酸酶样蛋白抗体 (IA-2A)。
4. 桥本甲状腺炎 (Hashimoto's Thyroiditis):免疫系统攻击甲状腺,导致甲状腺功能减退。核心检测靶点:抗甲状腺过氧化物酶抗体 (TPOAb)、抗甲状腺球蛋白抗体 (TgAb)。
5. 乳糜泻 (Celiac Disease):*对食物中的麸质(存在于小麦、大麦、黑麦中)产生异常免疫反应,损伤小肠绒毛。核心检测靶点:抗组织转谷氨酰胺酶抗体 (tTG-IgA)、抗肌内膜抗体 (EMA)。
ELISA试剂盒:如何精准锁定“自身抗体”?
酶联免疫吸附试验 (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA) 是检测血液等样本中自身抗体的核心技术,其高灵敏度、特异性及自动化优势使其成为自身免疫疾病诊断和监测的基石。
ELISA检测自身抗体的核心原理(以间接法为例):
1. 包被“诱饵”(抗原固定):
* 微孔板(通常是96孔板)的孔壁上预先包被特定的**纯化抗原**。这些抗原是免疫系统错误攻击的“目标”分子。
* 例如:检测RA的试剂盒会包被瓜氨酸化肽段(用于抗CCP抗体);检测SLE的会包有人源或重组DNA(用于抗dsDNA抗体);检测乳糜泻的会包被组织转谷氨酰胺酶(用于tTG抗体)。
2. 加入“嫌疑样本”(样本孵育):
* 将稀释后的患者血清或血浆样本加入微孔中。
* 如果样本中存在针对该抗原的特异性自身抗体,这些抗体会像“钥匙找到锁”一样,特异性结合到孔壁上固定的抗原上。
3. 标记“追踪器”(酶标二抗结合):
* 洗去未结合的样本成分。
* 加入酶标记的二抗。这种二抗能识别并结合人抗体(如人IgG)。常用的酶包括辣根过氧化物酶 (HRP) 或碱性磷酸酶 (AP)。
* 酶标二抗只会结合到那些已经与抗原结合的自身抗体上(即形成“抗原-自身抗体-酶标二抗”复合物)。
4. 显色“信号放大”(底物反应):
* 再次洗板,彻底洗去未结合的酶标二抗。
* 加入酶的特异性底物溶液。
* 结合在复合物上的酶会催化底物发生反应,产生可测量的信号(通常是颜色的变化,吸光度值增加)。
5. 解读“信号密码”(结果判定):
* 使用酶标仪测量每个孔在特定波长下的吸光度 (OD值)。
* OD值与样本中目标自身抗体的浓度成正比。
* 通过与试剂盒提供的标准曲线或临界值 (Cut-off) 比较,即可判断样本为阳性(存在该自身抗体)或阴性(不存在),并可进行定量或半定量分析。
ELISA在自身免疫疾病检测中的关键优势:
* 高灵敏度与特异性:能检测出极低浓度的自身抗体,并准确区分目标抗体与非目标抗体。
* 高通量:可同时处理大量样本,效率高,适合临床实验室常规检测。
* 标准化与自动化:试剂盒提供标准化流程和试剂,易于操作,可适配自动化设备,结果稳定可靠。
* 定量能力:许多ELISA试剂盒可提供抗体浓度数值,有助于疾病活动度监测(如SLE患者的抗dsDNA抗体水平变化)和治疗效果评估。
展望未来:
ELISA技术持续发展,多重检测技术(如多重微珠免疫分析)正崭露头角,可同时检测一份样本中的多种自身抗体,提供更全面的信息。自动化程度的提升也将进一步提高检测效率和标准化水平。
上海科博瑞生物科技有限公司ELISA试剂盒凭借精准、高效、可靠的特点,深受广大科研工作者的青睐。通过特异性捕获和量化血液中的“罪魁祸首”——自身抗体,ELISA为临床医生提供了关键的诊断依据,助力疾病的早期识别、精准分型和有效管理,为患者带来更及时、更个体化的诊疗方案。
自身免疫疾病,如同一场人体内部的“误伤悲剧”——免疫系统这个本该抵御外敌的“忠诚卫士”,错误地将自身健康的组织、器官或细胞识别为“入侵者”,并发动猛烈攻击。这种持续的自我攻击会导致广泛的炎症和组织损伤,引发一系列复杂的慢性疾病,如类风湿关节炎的关节疼痛变形、系统性红斑狼疮的多系统损害、1型糖尿病的胰岛素生产细胞破坏等。
常见的自身免疫疾病示例:
1. 类风湿关节炎 (Rheumatoid Arthritis, RA):免疫系统主要攻击关节滑膜,导致关节疼痛、肿胀、僵硬和进行性损伤。核心检测靶点:类风湿因子 (RF)和 抗瓜氨酸化蛋白抗体 (ACPA/抗CCP抗体)。
2. 系统性红斑狼疮 (Systemic Lupus Erythematosus, SLE):可影响皮肤、关节、肾脏、血液系统、神经系统等多个器官。核心检测靶点:抗核抗体 (ANA)及其特异性抗体谱(如抗dsDNA抗体、抗Sm抗体)。
3. 1型糖尿病 (Type 1 Diabetes Mellitus, T1DM):免疫系统特异性破坏胰腺中产生胰岛素的β细胞。核心检测靶点:抗胰岛细胞抗体 (ICA)、抗谷氨酸脱羧酶抗体 (GADA)、抗胰岛素抗体 (IAA)、抗酪氨酸磷酸酶样蛋白抗体 (IA-2A)。
4. 桥本甲状腺炎 (Hashimoto's Thyroiditis):免疫系统攻击甲状腺,导致甲状腺功能减退。核心检测靶点:抗甲状腺过氧化物酶抗体 (TPOAb)、抗甲状腺球蛋白抗体 (TgAb)。
5. 乳糜泻 (Celiac Disease):*对食物中的麸质(存在于小麦、大麦、黑麦中)产生异常免疫反应,损伤小肠绒毛。核心检测靶点:抗组织转谷氨酰胺酶抗体 (tTG-IgA)、抗肌内膜抗体 (EMA)。
ELISA试剂盒:如何精准锁定“自身抗体”?
酶联免疫吸附试验 (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA) 是检测血液等样本中自身抗体的核心技术,其高灵敏度、特异性及自动化优势使其成为自身免疫疾病诊断和监测的基石。
ELISA检测自身抗体的核心原理(以间接法为例):
1. 包被“诱饵”(抗原固定):
* 微孔板(通常是96孔板)的孔壁上预先包被特定的**纯化抗原**。这些抗原是免疫系统错误攻击的“目标”分子。
* 例如:检测RA的试剂盒会包被瓜氨酸化肽段(用于抗CCP抗体);检测SLE的会包有人源或重组DNA(用于抗dsDNA抗体);检测乳糜泻的会包被组织转谷氨酰胺酶(用于tTG抗体)。
2. 加入“嫌疑样本”(样本孵育):
* 将稀释后的患者血清或血浆样本加入微孔中。
* 如果样本中存在针对该抗原的特异性自身抗体,这些抗体会像“钥匙找到锁”一样,特异性结合到孔壁上固定的抗原上。
3. 标记“追踪器”(酶标二抗结合):
* 洗去未结合的样本成分。
* 加入酶标记的二抗。这种二抗能识别并结合人抗体(如人IgG)。常用的酶包括辣根过氧化物酶 (HRP) 或碱性磷酸酶 (AP)。
* 酶标二抗只会结合到那些已经与抗原结合的自身抗体上(即形成“抗原-自身抗体-酶标二抗”复合物)。
4. 显色“信号放大”(底物反应):
* 再次洗板,彻底洗去未结合的酶标二抗。
* 加入酶的特异性底物溶液。
* 结合在复合物上的酶会催化底物发生反应,产生可测量的信号(通常是颜色的变化,吸光度值增加)。
5. 解读“信号密码”(结果判定):
* 使用酶标仪测量每个孔在特定波长下的吸光度 (OD值)。
* OD值与样本中目标自身抗体的浓度成正比。
* 通过与试剂盒提供的标准曲线或临界值 (Cut-off) 比较,即可判断样本为阳性(存在该自身抗体)或阴性(不存在),并可进行定量或半定量分析。
ELISA在自身免疫疾病检测中的关键优势:
* 高灵敏度与特异性:能检测出极低浓度的自身抗体,并准确区分目标抗体与非目标抗体。
* 高通量:可同时处理大量样本,效率高,适合临床实验室常规检测。
* 标准化与自动化:试剂盒提供标准化流程和试剂,易于操作,可适配自动化设备,结果稳定可靠。
* 定量能力:许多ELISA试剂盒可提供抗体浓度数值,有助于疾病活动度监测(如SLE患者的抗dsDNA抗体水平变化)和治疗效果评估。
展望未来:
ELISA技术持续发展,多重检测技术(如多重微珠免疫分析)正崭露头角,可同时检测一份样本中的多种自身抗体,提供更全面的信息。自动化程度的提升也将进一步提高检测效率和标准化水平。
上海科博瑞生物科技有限公司ELISA试剂盒凭借精准、高效、可靠的特点,深受广大科研工作者的青睐。通过特异性捕获和量化血液中的“罪魁祸首”——自身抗体,ELISA为临床医生提供了关键的诊断依据,助力疾病的早期识别、精准分型和有效管理,为患者带来更及时、更个体化的诊疗方案。